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流式細胞儀的原理特征

發布時間:2021-03-08      點擊次數:666
  流式細胞儀原理:
 
  流式細胞儀能“看到”的物體大小是微米級的細胞或顆粒,波長范圍多在可見光范圍內。
 
  流式細胞儀的原理,簡而言之就是一定波的激光束直接照射到 高壓驅動的液流,產生的光信號被多個接收器接收,一個是在激光束直 線方向上接收到的前向角散射光信號,其他的是在激光束垂直方向上 接收到的光信號,包括側向角散射光信號和熒光信號。液流中懸浮的 細胞能夠使激光束發生散射,而細胞上結合的熒光素被激光激發后能 夠發射波長高于激發光的熒光,散射光信號和熒光信號被相應的接收 器掊收后,根據接收到信號的強弱就能反映出每個細胞的物理和化學 特征。
 
  具體來講就是,待測樣本被制備成單個細胞懸液,將感興趣的部分經特異性熒光染料染色,置于流式細 胞儀的樣品室。經樣品管,在氣體的壓力下進入流動室。流動室內充滿鞘液,在鞘液的約束 下。細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,成為細胞液柱。液柱與入射的激光束垂直相交,相交點稱為測量區。通過測量區的細胞被激發產生熒光。在與入射光束和液柱垂直的方向放置透鏡、反射鏡、濾光片等光學元件和檢測器,用以收集散射光信號以及熒光信號。被收集的熒光信號經電子電路處理放大后,輸人計算機。經計算機處理,得出可以判讀到該檢測樣本 性質、數量的數字信息。
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